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Thrombomodulin 유전자가 도입된 형질전환 복제돼지 생산/이해선 외

19 장기 조직 이식 조회 수 172 추천 수 0 2019.01.04 14:36:44

NIBP *.121.130.253 https://www.nibp.kr/xe/info4_3/126287

발행년 :	2018
구분 :	국내학술지
학술지명 :	한국수정란이식학회 학술대회
관련링크 :	http://www.riss.kr/link?id=A105840496

Thrombomodulin 유전자가 도입된 형질전환 복제돼지 생산

저자[authors] 이해선,박미령,윤정희,오건봉,황성수,황인설
학술지명[periodical name] 한국수정란이식학회 학술대회
권호사항[Volume/Issue] Vol.2018No.11[2018]
발행처[publisher] 한국수정란이식학회
자료유형[Document Type] 학술저널
수록면[Pagination] 29-29
언어[language] Korean
발행년[Publication Year] 2018
주제어[descriptor] Xenotransplantation, GalT KO, Thrombomodulin, Immune rejection

초록[abstracts]

[이종이식 시 사람과 돼지는 면역학 적으로 일치하지 않으므로, 면역세포의 활성화 및 조직의 병변 등을 유발한다. 특히, 영장류에는 존재하지 않고 돼지의 전 조직에서 발현되는 alpha-gal 인자에 의해, 이종이식 시 alpha-gal 항원에 대한 항체의 급격한 증가로 거부반응이 유발되며 영장류를 사망에 이르게 한다. 이에, 본 연구는 alpha-gal 합성에 관여하는 효소인 alpha-galactosyltransferase를 knock out(Gal-/-)한 돼지의 세포를 기반으로, 보체의 활성을 조절하는 membrane cofactor protein(MCP)과 혈액 응고를 저해하는 thrombomodulin(TBM)의 과발현을 유도하고자 하였다. 이는, 이종이식 시 발생하는 염증반응과 혈액응고 현상을 억제하는 복합형질 전환 돼지를 개발함으로 이종이식 후의 생존성 향상에 기여하고자 하였다. 따라서 codon modification 을 통해 염기서열을 변형한 MCP cDNA 는 CAG 프로모터를 이용하여 전 조직에서 발현되도록 하였고, TBM 은 Icam2 프로모터를 통해 혈관 내피세포 특이적인 발현을 유도하였다. 제작된 벡터를 Gal-/- 돼지의 섬유아세포에 도입하고 MCP 발현 수준이 높은 세포를 선별하여 세포주를 구축하였다. 구축된 체세포를 이용하여 체세포 복제란을 생산하고 외과적 방법으로 수란 돈에 이식하였다. 체외성숙(78%) 한 난자를 복제 및 융합(58%)한 후 4 두의 대리모에 각각 약 310 개의 복제란을 이식하였다. 대리모 1 두에서 임신(25%) 및 분만(25%)에 성공하였으며, 9 두의 산자 중 6 두가 생존하고 3 두는 사망하였다. 본 연구에서 생산된 TBM 유전자가 도입된 형질전환 복제돼지는 증식과정을 통해 축군을 조성하고 향후 영장류를 활용한 이종이식 연구에 활용될 예정이다.]

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