Optimization of transfection conditions in neural stem cells
저자
김우석
형태사항
29 p. ; 26 cm
일반주기
지도교수: 김현정 참고문헌 수록
학위논문사항
학위논문(석사)-- 중앙대학교 대학원 : 약학과 약물학 전공 2013. 8
발행국
서울
언어
영어
출판년
2013
초록 (Abstract)
신경줄기세포는 신경세포와 신경아교세포 등 중추신경계를 구성하는 중추신경계를 구성하는 주요세포들로 분화하는 잠재성을 갖는 세포이다. 이에 따라 신경줄기세포는 중추신경계 구성 ...
신경줄기세포는 신경세포와 신경아교세포 등 중추신경계를 구성하는 중추신경계를 구성하는 주요세포들로 분화하는 잠재성을 갖는 세포이다. 이에 따라 신경줄기세포는 중추신경계 구성 세포들의 퇴행으로 인하여 발생하는 알츠하이머병, 파킨슨병 그리고 헌팅턴병 등의 신경퇴행성질환에 대한 세포치료에 적용될 수 있다. 성공적인 세포 치료를 위해서는 신경줄기세포의 특정 세포로의 정교한 분화 조절이 필수적인데, 이를 위하여는 신경줄기세포의 분화와 증식을 조절하는 분자적 기전을 밝혀 내는 연구가 선행되어야 한다. 이 분자적 기전을 연구함에 있어서 중요한 방법 중의 하나가 유전자도입을 이용한 외부 DNA 혹은 RNA의 세포 내 도입을 통해 특정 유전자를 과발현 시키거나, 발현을 억제함으로써, 세포 내에서 특정 유전자의 역할을 연구하는 것이다. 신경줄기세포는 유전자도입이 어려운 세포이므로, 지질매개 유전자도입 등 일반적으로 쓰이는 방법으로는 충분한 효율로 유전자도입을 할 수가 없다. 따라서 신경줄기세포에서 특정 유전자의 발현 정도를 충분하게 조절하기 위하여는 유전자도입 효율을 높여 주는 것이 필수적이다. 따라서 본 연구에서는, 지질매개 유전자도입, 일렉트로포레이션 그리고 누클레오펙션의 세 가지 유전자도입 방법을 비교하여, 신경줄기세포에서 효과적으로 특정 유전자의 발현을 조절할 수 있는 조건을 탐색하였다. 본 연구는 위의 세 가지 유전자도입 방법 중 누클레오펙션이 신경줄기세포에 외부 유전자를 도입하는 효율적인 방법이라는 것을 보여주고 있다. 또한 본 연구는 누클레오펙션이 과발현 벡터를 이용한 유전자 과발현 뿐 아니라, 짧은 간섭 RNA를 이용한 유전자발현 억제에도 적용될 수 있다는 것을 보여주었다. 마지막으로, 신경줄기세포에 과발현 벡터가 짧은 간섭 RNA와 함께 누클레오펙션 되었을 때에도 유전자 과발현이 효율적으로 이루어지고 있음이 본 연구를 통하여 밝혀졌다. 이러한 발견들은 누클레오펙션이 신경줄기세포에서 유전자도입을 통한 특정 유전자 발현 조절을 위해 사용될 수 있으며, 따라서 누클레오펙션이 특정 유전자들이 신경줄기세포 운명을 결정짓는 분자적 기전의 연구에 효율적으로 적용될 수 있음을 보여주고 있다.